研究报告

茶树茉莉酸羧基甲基转移酶基因(CsJMT1)的克隆与表达分析  

曹克梅1,2 , 杨春2 , 郭燕2 , 陈娟2 , 李燕2 , 梁思慧2 , 林开勤2 , 乔大河2* , 陈正武2*
1贵州大学茶学院,贵阳, 550025; 2贵州省农业科学院茶叶研究所,贵州省茶种质创新工程技术研究中心,贵阳, 550006
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19 卷, 第 1 篇   
收稿日期: 2020年10月30日    接受日期: 2021年01月01日    发表日期: 2021年06月02日
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摘要

茉莉酸羧基甲基转移酶(jasmonic acid carboxyl methyltransferase, JMT)在茉莉酸类介导的植物生长发育以及防御调控中发挥着重要作用。本研究以茶树品种‘黔茶 1号’为材料,利用 RT-PCR方法克隆了一个JMT 基因并将其命名为CsJMT1。该基因编码区全长 1 077 bp,编码 358个氨基酸,含有一个 Methyltransf_7功能结构域,属于 SABATH家族成员。进化树分析显示其与柑橘和雷公藤的 JMT序列亲缘关系最近,序列相似性分别为 73.7%72.7%。以CsJMT1 的全长开放阅读框(ORF)序列构建 GFP融合蛋白表达载体,基于拟南芥原生质体的亚细胞定位分析显示其定位在细胞质。原核表达和蛋白纯化显示在破碎的细胞上清中可以检测到目的蛋白的表达。对外源 JASAMeSA处理以及茶尺蠖取食后‘黔茶 1号’叶片中CsJMT1 的表达进行荧光定量 PCR分析,结果显示外源 JASA处理后其表达均显著下调,但在 JA处理后 48 h其表达量又明显上调;而 MeSA处理后 2 h CsJMT1 的表达量达到峰值,随后又显著下调,在处理后 24 h又恢复到处理前水平;茶尺蠖取食则能够显著诱导其表达。对 3个品种的茶叶鲜叶摊放(萎凋)处理不同时间后检测CsJMT1 的表达情况则显示摊放(萎凋)处理诱导了其表达,但不同品种的诱导程度存在差异。本研究结果初步明确了CsJMT1 能够参与茶树防御响应以及香气形成调控。
 

关键词
茶树;茉莉酸羧基甲基转移酶;亚细胞定位;原核表达;茶尺蠖

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《分子植物育种》印刷版
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